2020年药包材质量标准细胞毒性检查法——提取法

医药包装药包材质量标准细胞毒性检查法——提取法具体操作如下：

阴性对照制备 取高密度聚乙烯参比物质，照供试品溶液制备项下的规定进行

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阴性对照制备 取生物毒性阳性参比物质，照供试品溶液制备项下的规定进行

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检查法 取生长旺盛的细胞悬浮液（1x10⁵个/ml）2ml，置直径35mm的平皿中培养单层细胞。培养不少于24h细胞至少达到80%近汇合后，吸去培养基，替换为供试品液、阴性対照液或阳性対照液。含血清培养基提取液和不含血清培养基提取液无需稀释，平行试验2份。0.9%氯化钠注射液为介质的提取液用含血清的细胞培养基稀释至提取液浓度为25%，平行试验2份。所有的培养物在（37±1）°C，增湿且含（5±1）%CO₂的培养箱中培养48h。48h后，在显微镜下观察培养物，如有必要，进行染色。

结果评价 按下表进行毒性评价和分级。若试验系统不成立，重复试验。供试品不超过2级（轻微毒），则判为合格。如需进行剂量——反应程度评价，可通过定量稀释供试品液，重复试验。